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滲透脆性檢測試劑盒(Parpart比色法)

簡要描述:滲透脆性檢測試劑盒(Parpart比色法),雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:YS0224
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-10-31
  • 訪  問  量:463

詳細介紹

滲透脆性檢測試劑盒(Parpart比色法是參與整個生物體基本代謝的中間產(chǎn)物之一,可通過三羧酸循環(huán)實現(xiàn)體內(nèi)糖、脂肪和氨基酸間的互相轉(zhuǎn)化,

丙酮酸在三大營養(yǎng)物質(zhì)的代謝聯(lián)系中起著重要的樞紐作用。丙酮酸是糖無氧代謝的產(chǎn)物,科研工作者常將丙酮酸和乳酸一

起研究,并用二者的比值推算循環(huán)衰竭的程度。丙酮酸檢測可采用乳酸脫氫酶催化法或二硝基苯肼比色法。

雅吉生物丙酮酸檢測試劑盒(二硝基苯肼微板法)檢測原理是在酸性條件下,丙酮酸與二硝基苯肼反應(yīng),

生成丙酮酸-二硝基苯腙復(fù)合物,后者經(jīng)氧化呈棕紅色,通過酶標儀測定520nm處吸光度,據(jù)此通過與標準曲線對比可以

計算出PA水平。該試劑盒可用于檢測植物、細胞或組織、血清等樣品中內(nèi)源性的丙酮酸含量,尤其適用植物樣品丙酮酸含量

的檢測。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

三、自備材料:

1、離心管或小試管

2、蒸餾水

3、酶標儀、96孔板


四、操作步驟(僅供參考):

1、配制組織勻漿液(1×)∶取10ml組織勻漿液(3×)加入20ml蒸餾水即成。

2、配制PA Assay Buffer (1x)∶取10ml PA Assay Buffer (1.5×)加入5ml蒸餾水即成。

3、準備樣品︰

①血清、尿液及其他體液樣品:血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-20°C凍存。

②組織樣品︰稱取1g組織樣品置于勻漿器中,再加入1ml組織勻漿液(1x)仔細研磨,振搖提取靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存,用于PA的檢測。

③植物材料︰稱取1g植物材料置于勻漿器中,再加入1ml組織勻漿液(1×)仔細研磨,振搖提取,靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存,用于PA的檢測。

④高濃度樣品:如果樣品中含有較高濃度的PA,可以使用原有的裂解液或PBS等進行稀釋,如雞血清可稀釋5~10倍后檢測。

4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_到60μg/ml,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_到60μg/ml。

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注意事項:

1、實驗材料應(yīng)盡量新鮮,如取材后不立即使用,應(yīng)存于-20°C.

2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請小心操作。

4、TA標定液容易長菌,宜4℃保存,一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請棄用。

5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進行滴定。

6、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值。

7、如果所測樣品的濃度過高,應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,并將稀釋倍數(shù)帶入公式。

8、如果樣品顏色較深,滴定終點不易觀察,應(yīng)采用電位滴定法。

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D3001Dnase I(Rnase free)

S0123Rnase A(20mg/ml)

C5023Exonuclease T

C5024Exonuclease VII

C5026Exonuclease III

C5027Endonuclease IV

C5044Thermostable  RnaseH

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C2004無內(nèi)毒素Strep tagII Benzonase核酸酶

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